按溶質(zhì)在兩相分離過程的物理化學(xué)原理分類

  (1) 吸附色譜      用固體吸附劑作固定相，以不同極性溶劑作流動(dòng)相，依據(jù)樣品中各組分在吸附劑上吸附性能的差別來實(shí)現(xiàn)分離。

  (2) 分配色譜   用載帶在固相基體上的固定液作固定相，以不同極性溶劑作流動(dòng)相，依據(jù)樣品中各組分在固定液上分配性能的差別來實(shí)現(xiàn)分離。根據(jù)固定相和液體流動(dòng)相相對極性的差別，又可分為正相分配色譜和反相分配色譜。當(dāng)固定相的極性大于流動(dòng)相的極性時(shí)，可稱為正相分配色譜或簡稱正相色譜( Normal Phase Chromatography);若固定相的極性小于流動(dòng)相的極性時(shí)，可稱為反相分配色譜或簡稱反相色譜(Reversed Phase Chromatography)。

   (3) 離子色譜      用高效微粒離子交換劑作固定相，以具有一定pH值的緩沖溶液作流動(dòng)相，依據(jù)離子型化合物中各離子組分與離子交換劑上表面帶電荷基團(tuán)進(jìn)行可逆性離子交換能力的差別而實(shí)現(xiàn)分離。

  (4) 體積排阻色譜        用化學(xué)惰性的多孔性凝膠作固定相，按固定相對樣品中各組分分子體積阻滯作用的差別來實(shí)現(xiàn)分離。以水溶液作流動(dòng)相的體積排阻色譜法，稱為凝膠過濾色譜( Gel Filtration Chromatography);以有機(jī)溶劑作流動(dòng)相的體積排阻色譜法，稱為凝膠滲透色譜法(Gel Permeation Chromatograhy)。

  (5) 親和色譜  以在不同基體上，鍵合多種不同特性的配位體作固定相，用具有不同pH值的緩沖溶液作流動(dòng)相，依據(jù)生物分子(氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、核堿、核苷、核苷酸、核酸、酶等)與基體上鍵聯(lián)的配位體之間存在特異性親和作用能力的差別，而實(shí)現(xiàn)對具有生物活性的生物分子的分離。

按溶質(zhì)在色譜柱洗脫的動(dòng)力學(xué)過程分類

   (1) 洗脫法(又稱淋洗法)      如將含三組分的樣品注入色譜柱，流動(dòng)相連續(xù)流過色譜柱，并攜帶樣品組分在柱內(nèi)向前移動(dòng)，經(jīng)色譜分離后，樣品中不同組分依據(jù)與固定相和流動(dòng)相相互作用的差別，而順序流出色譜柱。此法在液相色譜分析中獲得最廣泛的應(yīng)用。

   (2) 前沿法(迎頭法)   如將含三個(gè)等量組分的樣品溶于流動(dòng)相，組成混合物溶液，并連續(xù)注入色譜柱，由于溶質(zhì)的不同組分與固定相的作用力不同，則與固定相作用最弱的第一個(gè)組分首先流出，其次是第二個(gè)組分與第一個(gè)組分混合流出，最后是與固定相作用最強(qiáng)的第三個(gè)組分與第二和第一個(gè)組分混合一起流出。此法僅第一個(gè)組分的純度較高，其它流出物皆為混合物，不能實(shí)現(xiàn)各個(gè)組分的完全分離，現(xiàn)已較少使用。

  (3) 置換法（頂替法） 當(dāng)含三組組分的混合物樣品注入色譜柱以后，各組分皆與固定相有強(qiáng)作用力，若使用一般流動(dòng)相無法將它們洗脫下來，為此可使用一種比樣品組分與固定相間作用力更強(qiáng)的置換劑(或稱頂替劑)作流動(dòng)相，當(dāng)它注入色譜柱后，可迫使滯留在柱上的各個(gè)組分，依其與固定相作用力的差別而依次洗脫下來，且各譜帶皆為各個(gè)組分的純品。置換法現(xiàn)已在大規(guī)模制備色譜中獲廣泛應(yīng)用，在生物大分子純品制備中取得良好的效果。